Radiomarcação do hormônio de crescimento porcino, murino e um potencial antagonista G118R-mGH para estudo de biodistribuição

Autores

DOI:

https://doi.org/10.15392/2319-0612.2024.2744

Palavras-chave:

Hormônio de Crescimento , Radiomarcação , Iodo , SPECT-CT

Resumo

Este estudo teve como objetivo radiomarcar o hormônio do crescimento porcino (pGH), murino (mGH) e seu antagonista (G118R-mGH) com os radioisótopos de iodo ¹³¹I e ¹²³I, visando investigar a biodistribuição e o transporte cerebral desses hormônios. A radiomarcação foi realizada utilizando o método de Cloramina T, uma técnica utilizada para iodinação de proteínas. Os produtos radiomarcados foram caracterizados por técnicas físico-químicas como SDS-PAGE, cromatografia líquida de alta eficiência por exclusão molecular (HPLC-SE) e cromatografia em papel ascendente medida através da tomografia computadorizada por emissão de fóton único (SPECT), demonstrando alta pureza radioquímica, superior a 95% e preservação do tamanho molecular. Ensaios in vitro de estabilidade indicaram que os radiomarcadores mantiveram sua integridade por pelo menos um período de 24 horas. Estudos de biodistribuição in vivo em camundongos revelaram padrões de distribuição tissular distintos para o mGH e o G118R-mGH, sugerindo diferentes mecanismos de captação e metabolização. A utilização de ¹²³I permitiu a realização de estudos de imagem por SPECT-CT, que se mostraram importantes para avaliar a capacidade do mGH e do G118R-mGH atravessarem a barreira hematoencefálica e se distribuirem em regiões específicas do cérebro. Os resultados obtidos neste trabalho evidenciam a versatilidade do protocolo de radiomarcação empregado e o seu potencial para a investigação de processos biológicos complexos e aplicação na pesquisa.

Downloads

Os dados de download ainda não estão disponíveis.

Biografia do Autor

  • Carlos Soares, IPEN

    Graduado em Farmácia e Bioquímica pela Universidade de São Paulo (1989), realizou Mestrado (1995) e Doutorado (2000) em Tecnologia Nuclear - Aplicações pela Universidade de São Paulo. Atualmente é pesquisador do Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN-CNEN/SP) e professor de pós-graduação vinculado à Universidade de São Paulo. Com experiência em biotecnologia na expressão de proteínas recombinantes por bactéria e por células de mamífero. Atua principalmente no seguinte tema: síntese, purificação, caracterização e aplicações de hormônios recombinantes. Atualmente é Gerente do Centro de Biotecnologia do IPEN. Bolsista de Produtividade desen. Tec. e Extensão Inovadora do CNPq - Nível 2.

     

Referências

RANKE, M. B., & WIT, J. M. (2018). Growth hormone - past, present and future. Nat Rev Endocrinol, v. 14, n.5, p. 285-300, 2018.

FURIGO, I. C.; METZGER, M.; TEIXEIRA, P. D. S.; SOARES, C. R. J.; DONATO, J. Distribution of growth hormone-responsive cells in the mouse brain. Brain Structure and Function, v. 222, p. 222 – 341, 2017.

COCULESCO J. Blood-brain barrier for human growth hormone and insulin-like growth factor-I. J Pediatr Endocrinol Metab., v.12, n.2, p. 113-124, 1999.

NYBERG, F. Growth hormone in the brain: characteristics of specific brain targets for the hormone and their functions significance. Frontiers in Neuroendocrinology, v. 21, n. 4, p. 330-48, 2000.

VAIDYANATHAN, G.; ZALUTSKY, M. R. The radiopharmaceutical chemistry of the radioisotopes of iodine. Radiopharmaceutical Chemistry, v. 978, n. 3, p. 122, 2019.

YAMADA, A.; TRABOULSI, A.; DITTERT, L. W.; HUSSAIN, A. A. Chloramine-T in radiolabeling techniques. III. Radioiodination of biomolecules containing thioether groups. Analytical Biochemistry, v. 277, n. 2, p. 232-5, 2000.

ANDREWS, T. M.; ANDREWS, W. W.; BAKER, C. An investigation into the removal of enzymes from paper following conservation treatment. Journal of the American Institute for Conservation, v. 31, n. 3, p. 313-323, 1992.

KOPCHICK, J. J.; LIST, O. E.; KELDER, B.; GOSNEU, S. E.; BERRYMAN, E. D. Evaluation of growth hormone (GH) action in mice: discovery of GH receptor antagonists and clinical indications. Molecular and Cellular Endocrinology, v. 386, p. 34-45, 2014.

MODE, A.; TOLLET, P.; WELLS, T.; CARMIGNAC, D. F.; CLARK, R. G.; CHEN, W. Y.; KOPCHICK, J. J.; ROBINSON, I. C. The human growth hormone (hGH) antagonist G120RhGH does not antagonize GH in the rat, but has paradoxical agonist activity, probably via the prolactin receptor. Endocrinology, v. 137, n. 2, p. 447-54, 1996.

KOPCHICK, J. J.; PARKINSON, C.; STEVENS, E. C.; TRAINER, P. J. Growth hormone receptor antagonists: discovery, development, and use in patients with acromegaly. Endocrine Reviews, v. 23, n. 5, p. 623-46, 2002.

SOARES, C. R.; MORGANTI, L.; MILOUX, B.; LUPKER, J. H.; FERRARA, P.; BARTOLINI, P. High-level synthesis of human prolactin in Chinese-Hamster ovary cells. Biotechnology and Applied Biochemistry, v. 32 (Pt 2), p. 127-135, 2000.

MENEZES ACSC; SUZUKI MF; OLIVEIRA JE; FURIGO IC; DONATO J; RIBELA, MTCP; BARTOLINI, P; SOARES, C R J. Expression, purification and characterization of the authentic form of human growth hormone receptor antagonist G120R-hGH obtained in Escherichia coli periplasmic space. Protein Expression and Purification. v. 131, p. 91-100, 2017.

BARTOLINI, P., & RIBELA, M. T. Influence of chloramine T iodination on the biological and immunological activity or the molecular radius of the human growth hormone molecule. Journal of immunoassay, v. 7, n. 3, p. 129–138, 1986.

GREENWOOD, F. C.; HUNTER, W. M.; GLOVER, J. S. The preparation of i-131-labelled human growth hormone of high specific radioactivity. The Biochemical journal, v. 89, n. 1, p. 114–123, 1963.

BISCAYART, P. L.; PALADINI, A. C.; VITA, N.; ROGUIN, L. P. Preparation of 125I-labeled human growth hormone of high quality binding properties endowed with long-term stability. Journal of immunoassay, v. 10, n. 1, p. 37–56, 1989.

FISKER S. Physiology and pathophysiology of growth hormone-binding protein: methodological and clinical aspects. Growth hormone & IGF, v. 16, n. 1, p. 1–28, 2006.

BERRY, R., MCGINNIS, G. R., BANERJEE, R. R., YOUNG, M. E., & FRANK, S. J. Differential tissue response to growth hormone in mice. FEBS open bio, v. 8, n. 7, p. 1146–1154, 2018.

MENEZES, F.; WASINSKI, F.; DE SOUZA, G. O.; NUNES, A. P.; BERNARDES, E. S.; DOS SANTOS, S. N.; DA SILVA, F. F. A.; PERONI, C. N.; OLIVEIRA, J. E.; KOPCHICK, J. J.; BROWN, R. S. E.; FERNANDEZ, G.; DE FRANCESCO, P. N.; PERELLÓ, M.; SOARES, C. R. J.; DONATO, J. The pattern of growth hormone action in the mouse brain. Endocrinology, v. 165, n. 7, 2024.

Downloads

Publicado

19-05-2025

Como Citar

Radiomarcação do hormônio de crescimento porcino, murino e um potencial antagonista G118R-mGH para estudo de biodistribuição. Brazilian Journal of Radiation Sciences, Rio de Janeiro, Brazil, v. 12, n. 4A (Suppl.), p. e2744, 2025. DOI: 10.15392/2319-0612.2024.2744. Disponível em: https://bjrs.org.br/revista/index.php/REVISTA/article/view/2744. Acesso em: 16 jul. 2025.